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In Atene, Lisistrata raduna l'assemblea delle donne di Atene e del Peloponneso e persuade le spose a non avere rapporti con gli uomini (non sono d'accordo sui mariti) finché non sarà raggiunta la pace e dichiara: "Atene si riappacifichi con Sparta: così tornerà l'armonia nelle case di Atene e del Peloponneso". Lisistrata e le donne bloccano l'accesso alle loro case ad Atene, e gli Ateniesi, inizialmente con la forza poi con suppliche, cercano invano di riportare a casa Lisistrata e le altre. Le spose, insieme a Lisistrata, resistono e impongono il disarmo. Da Sparta giunge una delegazione, e l'indomita Lisistrata, accompagnata dalle donne, costringe gli Ateniesi ad accettare la pace. Nelle case si instaura l'armonia e la tranquillità ed a Atene si celebra un festoso trionfo.